影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯携手蜘蛛格温，穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命，迈尔斯誓言打破命运魔咒，找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突，一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响！
冈本信彦 长谷川育美 近藤浩德
一宫丽 铃木崚汰 山根绮 濑户桃子 叶山翔太 熊谷健太郎 小野贤章 津田健次郎
三瓶由布子 和泉风花 梅田修一朗 佐久间大介 大冢刚央 千叶翔也 中岛良树 种崎敦美 内山夕实 武内骏辅
未知
本村玲奈 花江夏树 山村响 陽木くるみ 月城日花 中村悠一 久野美咲 斋贺光希 三石琴乃
神月柚莉爱 村濑步 阿座上洋平 白石凉子 野岛裕史 稗田宁宁
布鲁克林·诺斯泰特 朱莉·黄·拉帕波特 卢卡·迪亚兹 以利沙·威廉斯 布拉克斯顿·昆尼 本杰明·普莱萨拉 布雷特·吉普森 杰瑞米·乔丹 敖德萨·阿锡安 詹妮安·加罗法洛 卢·戴蒙德·菲利普斯
芹泽优 田丸笃志 早见沙织 梅田修一朗 八代拓 花江夏树 前田佳织里 大久保瑠美
石谷春贵 若山诗音 永濑安奈 结川麻希 白浜灯奈乃 伊濑茉莉也 齐藤壮马 土屋神叶 白石晴香 祐仙勇
小林裕介 高桥李依 新井里美 村川梨衣 江口拓也 植田佳奈 铃木绘理 菲鲁兹·蓝 杉田智和 河西健吾 小原好美
演员：一宫丽 铃木崚汰 山根绮 濑户桃子 叶山翔太 熊谷健太郎 小野贤章 津田健次郎
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演员：布鲁克林·诺斯泰特 朱莉·黄·拉帕波特 卢卡·迪亚兹 以利沙·威廉斯 布拉克斯顿·昆尼 本杰明·普莱萨拉 布雷特·吉普森 杰瑞米·乔丹 敖德萨·阿锡安 詹妮安·加罗法洛 卢·戴蒙德·菲利普斯
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